糖類の分析で用いるHPLCの検出器について

一般財団法人 食品分析開発センターSUNATEC

第三理化学検査室

【はじめに】

糖類の分析には、高速液体クロマトグラフ(HPLC)が広く用いられており、示差屈折率検出器や蛍光検出器などによる分析が可能である。本稿ではHPLCによる糖類の分析例と各検出器の原理について紹介する。

【示差屈折率検出器(RID)による分析】

示差屈折率検出器(RID)は、溶媒と目的成分の屈折率の差を利用して検出を行う汎用的な検出器である。糖類のように紫外(UV)吸収を持たない成分の検出に適している。

示差屈折率検出器の測定フロー

図1. 示差屈折率検出器による分析フロー

【蛍光検出器(FLD)およびその他の検出器】

蛍光検出器やパルス電導度検出器は、高感度かつ選択的な糖類分析に用いられる。誘導体化法を組み合わせることで、低濃度の糖類も精度よく分離定量することが可能である。

検出器の原理図

図2. 各検出器の測定原理

糖類分析のクロマトグラム1

図3. 糖類標準溶液のクロマトグラム(例1)

糖類分析のクロマトグラム2

図4. 糖類標準溶液のクロマトグラム(例2)

糖類分析のクロマトグラム3

図5. 実試料中の糖類分析クロマトグラム

【おわりに】

糖類の分析においては、目的成分の濃度や試料の夾雑物の影響を考慮し、最適な検出器および測定条件を選択することが重要である。当センターでは各種糖類分析の検査・ご相談に対応しております。

参考文献

1)
食品表示基準について(平成27年3月30日消食表第139号) 「別添 栄養成分等の分析方法等」
https://www.caa.go.jp/policies/policy/food_labeling/food_labeling_act/assets/food_labeling_cms201_250328_1015.pdf
2)
GL Sciences “糖17成分の一斉分析”
https://www.gls.co.jp/viewfile/?p=LT006
3)
島津製作所 “Nexera 応用システム 還元糖分析システム”
https://www.an.shimadzu.co.jp/sites/an.shimadzu.co.jp/files/pim/pim_document_file/an_jp/brochures/21493/c190-0560.pdf
4)
H.Mikami and Y.Ishida. “Post-column fluorometric detection of reducing sugar in high-performance liquid chromatography using arginine”
https://www.jstage.jst.go.jp/article/bunsekikagaku1952/32/6/32_6_E207/_pdf/-char/ja
5)
島津製作所 続・糖類の検出法
https://www.an.shimadzu.co.jp/service-support/technical-support/analysis-basics/hplc/faq/example/lctalk-51intro/index.html